| teema: | Titiini vastane monokloonne antikeha Y1C7.A3 kui võimalik raku - ja arengumarker neuraalset päritolu rakkudes |
|---|---|
| tunnusnumber: | ETF6581 |
| projekti tüüp: | Eesti Teadusfondi grant |
| erialad: |
3.1. Biomeditsiin |
| seisund: | käimasolev |
| asutus: | TÜ Arstiteaduskond |
| projekti juht: | Aavo-Valdur Mikelsaar |
| kestus: | 01.01.2006 - 31.12.2009 |
| kirjeldus: | Annotatsioon: Eelneva töö tulemusena (sihtfinantseering TARMP0421, ETF grantid 5250 ja 5499, As LabAs vahendid) on loodud monokloonne antikeha Y1C7.A3, mille antigeen identifitseeriti MALDI-TOF ja ESI-MS ning proteoomika andmebaasi Swiss-Prot ja TrEMBL abil korduvalt kui titiin (titiini mingi isovorm ) . See antigeen ekspresseerub organismi erinevates rakkudes ja kudedes, sealhulgas inimese loote südame – ja skeletilihastes, veresoonte intimas, kopsu arenevate alveoolide seintes, neeru tuubuleid ümbritsevas stroomas, glomeerulites ja arenevas ajukoes . Täiskasvanu südame-ja skeletilihastes ekspresseerub antigeen ainult üksikutes rakkudes ja ebaregulaarselt. Üllatuslikult selgus, et Y1C7.A3 antigeen ekspresseerub selgelt (ehkki heterogeenselt) ka gliiarakkudes, kuid mitte vähemalt üht tüüpi beta-III-tubuliini positiivsetes in vitro tüvirakkudest diferentseerunud neuronites. Pikemat aega in vitro diferentseerunud rakkudes näeb sageli antigeeni akkumulatsiooni rakukehas ja neuriitide otstes, kuid mitte kasvukoonustes. Y1C7.A3 antigeen ekspresseerub in vitro ka roti aju granulaarrakkude kultuuris, ehkki ainult teatud tüüpi suurtes individuaalsetes rakkudes, aga mitte granulaarrakkudes enestes ning in vivo individuaalsetes rakkudes roti aju erinevates regioonides. Titiini esinemise kohta neuraalses koes on seni väga vähe andmeid (Max A., et al. 1996 ; Schmidt M.M., et al. 2001; Zhao Y. et al., 2001). Täielikult puudub aga info isovormide kohta, mida neuraalne kude võib sisaldada, funktsioonidest rääkimata. Meie esialgsed tulemused aga lubavad oletada, et titiin tõesti esineb neuraalset päritolu rakkudes ja võib omada olulist rolli teatavat tüüpi neuraalsete rakkude diferentseerumisel. Käesolevas projektis planeerime me uurimistööd kolmes põhilises suunas: 1. viia läbi detailsem Y1C7.A3 antigeense determinandi analüüs titiini molekulil, määrata tema asukoht ; selgitada, kas titiini vastaste monokloonsete antikehade immunotsütokeemiliselt leitud seostumine neurofilamentide valkudega on tegelik rist-reaktsioon või on tegemist neljakomponendilise neurofilamendid-titiin valgukompleksi esinemisega või mõlema nähtusega. 2. uurida Y1C7.A3 antigeeni (titiini) ekspressiooni seaduspärasusi (mRNA ja valgu tasemel) in vitro erinevates neuraalse koe tüvirakkudes ja diferentseerunud rakkudes. Selgitada, kas Y1C7.A3 võiks kasutada diferentseerumise markerina neuraalsete rakkude diferentseerumisel in vitro. Paralleelselt uuritakse Y1C7.A3 avaldumist ka teist tüüpi tüvirakkudes (limbaalsed tüvirakud) ja neuraalset päritolu kasvajaliinides (glioblastoomid) 3. uurida Y1C7 antigeeni ekspressiooni roti individuaalse arengu etappidel, lähtudes meie leiust, et Y1C7.A3 antigeen ekspresseerub in vitro roti aju granulaarrakkude kultuuris ainult teatud tüüpi suurtes individuaalsetes rakkudes, aga mitte granulaarrakkudes enestes ning in vivo individuaalsetes rakkudes roti aju erinevates regioonides. Uurimise eesmärgiks on selgitada Y1C7.A3 kasutamise võimalusi ajukoe spetsiifilise raku-ja arengumarkerina. Loodame uuringu tulemusena saada täiendavaid teadmisi faktorite suhtes, mis osalevad aju arengus närvirakkude diferentseerumisel. Võimalik, et need uued teadmised avardavad meie arusaamist ka mõnede neuroloogiliste haiguste , näiteks Sclerosis multiplexi , mille puhul on leitud ajukoes titiini üleekspressiooni (Zhao Y. Et al.,2001), tekkemehhanismide mõistmisel. |
| projektiga seotud isikud | ||||
|---|---|---|---|---|
| nr | nimi | asutus | amet | |
| 1. | Anti Kalda | |||
| 2. | Ingrid Kalev | |||
| 3. | Aavo-Valdur Mikelsaar | Tartu Ülikool | ||
| 4. | Tõnu Püssa | |||
| 5. | Alar Sünter | |||
| 6. | Peeter Toomik | |||