| kirjeldus: |
Prioonide haigused on neurodegeneratiivsed haigused, millest tuntumad on Creutzfeldt-Jakobi tõbi inimestel, 'scrapie' lammastel ja 'bovine spongifrom encephalophaty' ehk hullulehmatõbi. Haigust iseloomustab tervete närvirakkude häving ja suures koguses muteerunud priooni valgu akumuleerumine ajus. Siiani ei ole teada, millised mehhanismid viivad prioonide muteerumiseni ja närvirakkude hävinemiseni. Hiljuti on näidatud, et prioonidega infekteeritud loomade ajudes esineb tavalisest rohkem rauda, samuti on loomade ajudes mõõdetud suurenenud oksüdatiivset stressi. Käesoleva projekti eesmärgiks on uurida raua regulatsiooni ja raua poolt indutseeritud oksüdatiivset stressi prioonidega infekteeritud neuroblastooma rakkudes, kasutades seega rakumudelit haigusega seotud biokeemiliste protsesside tundmaõppimiseks. Spetsiifiliseks uurimisobjektiks on ensüüm NifS, mis on seotud raua-väävli komplekside biosünteesiga rakkudes ning varem on näidatud, et raua-väävli komplekside ebanormaalse sünteesi tulemusel akumuleerub raud mitokondrites ja rakkudes suureneb oksüdatiivne stress. Grandi taotleja on varem klooninud nifs geeni inimeste rakkudest ja uurinud selle valgu biosünteesi, näidates, et inimeste rakkudes esineb üks nifs mRNA, millest sünteesitakse vähemalt kaks valgu vormi, mis lokaliseeruvad kas mitokondritesse või tsütoplasmasse ja tuuma. Uuringud pärmirakkudes on näidanud, et NifS valgu biosünteesi inhibeerimine viib raua ebanormaalse akumuleerumiseni mitokondrites, vähendab raua-väävli komplekside sünteesi ja suurendab oksüdatiivset stressi rakkudes. Meie esialgsed katsed on näidanud, et prioonidega infekteeritud N2a neuroblastooma rakkudes on ligikaudu 2 korda madalam NifS valgu tase võrreldes infekteerimata rakkudega, mistõttu NifS valgu biosünteesi ja raua ainevahetuse muutunud regulatsiooni uurimine prioonidega infekteeritud neuroblastooma rakkudes aitab meil paremini mõista biokeemilisi protsesse, mis viivad prioonide haiguste väljakujunemiseni, ja võivad aidata töötada välja ravimeid haiguse vastu.
|