| kirjeldus: |
Käesoleva projekti eesmärgiks on uute unikaalsete hemostaasi, angiogeneesi ja apoptoosi mõjutavate valkude molekulaarsete ja funktsionaalsete omaduste uurimine. Valgud eraldatakse viperiidsete madude mürkidest, kombineerides erinevaid meetodeid- geelfiltratsiooni, ioonvahetust, isoelektrilist fokuseerimist, kõrgsurve vedelikkromatograafiat, afiinsuskromatograafiat. Eraldatud valkude rakulise toime uurimisel kasutatakse trombotsüüte, HUVEC, K-562 ja teisi rakke. Määratakse gürsa mürgist eraldatud unikaalsete valkude (näiteks disintegriinid, disintegriinisarnased valgud, apoptoosi indutseerivad metalloproteinaasid) primaarne struktuur neid kodeeriva DNA kaudu, selleks kasutame meie poolt sünteesitud gürsa mürginäärme cDNA panka.Saadud primaarstruktuuride ja kirjanduses leiduvate andmete analüüs võimaldab selgitada nende oluliste valkude struktuuri ja funktsiooni vahelisi seoseid, sealhulgas ka seostumist eri tüüpi rakkude pinnal olevate retseptoritega. Reeglina disintegriinid ei ole glükosüleeritud, see loob eelduse rekombinantsete valkude saamiseks bakteriaalsetes ekspressiooni süsteemides. Rekombinantsete valkude omadusi võrreldakse natiivsete valkudega. Saadud tulemused on olulised valk-valk interaktsioonide fundamentaaluuringutel, mõned valgud kui angiogeneesi inhibiitorid ja ka kui trombotsüütide agregatsiooni pidurdajad võivad osutuda potentsiaalseteks ravimiteks vähi ja ka trombooside korral. Uuritud ainete struktuuride alusel on võimalik disainida efektiivsemaid potentsiaalseid ravimeid. |