| kirjeldus: |
Imetajate tsüklooksügenaasidel on kaks isovormi COX-1 ja COX-2, mis mõlemad katalüüsivad prostaglandiinide sünteesi esimest, kiirust limiteerivat etappi. Kui COX-1 seostatakse eelkõige füsioloogilise ehk nn. "majahoidja" funktsiooniga, siis COX-2 ekspressioonitaseme olulist tõusu on täheldatud reumatoidse artriidi, pärasoole vähkkassvaja, Alzheimeri tõve jm haiguste korral. COX-2 põletiku indutseeriva ja neoplastilise aktiivsuse kontrolliks on oluline COX-2 selektiivsete inhibiitorite väljatöötamine, mille edukus sõltub eelkõige tsüklooksügenaaside katalüüsimehhanismi ning COX-1 ja COX-2 struktuuriliste ja mehhanistlike iseärasuste detailsest tundmisest. Käesoleva taotluse eesmärgiks on võrrelda inimese COX isosüümide ja nende võimalike evolutsiooniliste eellaste, koralli tsüklooksügenaaside, unikaalseid omadusi ning sel teel saada teavet COX katalüüsi mõnede aspektide paremaks mõistmiseks. Meie poolt avastatud koralli tsüklooksügenaasid on esimesteks mitteselgroogset päritolu tsüklooksügenaasideks. Nagu näitavad esialgsed tulemused, omavad nad, vaatamata suurele struktuurilisele sarnasusele inimese COX isosüümidega, mitmeid olulisi katalüütilisi erinevusi. See teeb neist väärtuslikud mudelensüümid inimese COX isosüümide seni tundmata katalüüsiprobleemide uurimiseks. Käesoleva projekti raames on plaanis uurida COX katalüüsi järgmisi aspekte: 1) oksüdatsioonireaktsiooni stereokontrolli mehhanismid arahhidoonhappe C-15 juures COX katalüüsis; 2) koralli COX ebaharilikult madala peroksüdaas-aktiivsuse põhjused ning selle mõju oksügenaasi reaktsiooni käivitamisele ja tagamisele; 3) N-glükosüleerimismustri kui terviku ja üksikute glükosüleerimistsentrite mõju tsüklooksügenaasi katalüütilisele aktiivsusele ja 4) koralli COX geeni(de) struktuurianalüüs COX-1 ning COX-2 geenide duplikatsiooni valguses. |