| kirjeldus: |
Viimasel ajal meie laboratooriumides tehtud uurimistöö tulemusel on selgunud, et mitokondrite ja tsütoskeleti valkude vaheliste tihedate interaktsioonide tõttu moodustavad oksüdatiivsetes lihasrakkudes ka müofibrille ja sarkoplasmaatilist retiikulumi hõlmavad funktsionaalsed kompleksid. Käesoleva projekti põhieesmärgiks on arendada edasi eelnevat uurimistööd kombineerides optilisi ja molekulaarbioloogilisi kindla valk-valk kompleksi tekkele suunatud geenimodifikatsiooni tehnikaid ja uurida erinevate ATP mikro- ja makrodomeenide vahelisi ühendusi. Kasutades spetsiifilisele valgukompleksi tekkele suunatud rekombinantseid lutsiferaase ja inaktiveeritud kreatiinkinaasi isoensüüme uuritakse rakkudes ATP mikrokompartmentalisatsiooni. Respiromeetria, spektrofotomeetria ja HPLC analüüsi meetodite abil uuritakse permeabiliseeritud lihasrakkudes mitokondrite funktsiooni ja selle regulatsiooni mis toimib rakusiseste kommunikatsioonide kaudu. Mitokondrite, müofibrillide ja rakumembraanide ligiduses asuvates mikrokompartmentides adeniinnukleotiidide kontsentratsioone ja kanaliseerimist ning mitokondrite ja teiste rakustruktuuride vahelisi kompleksseid struktuurseid ja funktsionaalseid seoseid uuritakse normaalsetes rakkudes ja südant isheemiakahjustuste eest kaitsva eelkohastumise tingimustes. Uurimistulemusi analüüsitakse kompartmentaliseeritud energia ülekande matemaatilise mudeli abil. Käesolev projekt jätkab ja arendab edasi juba traditsiooniliseks kujunenud rahvusvahelist koostööd Euroopa Teadusruumis kahe Eesti laboratooriumi ja J. Fourier Ülikooli Prantsusmaal, vahel. Lisandunud on uus partner - Prof. Be Wieringa laboratoorium Hollandis (Nijmegen Center for Molecular Life Sciences, University of Nijmegen). |